提醒：點這里加小編微信（領(lǐng)取免費資料、獲取最新資訊、解決考教師一切疑問?。?/p>
(1)從基因文庫中獲取
基因文庫：將含有某種生物不同基因的許多DNA片段，導(dǎo)入受體菌的群體儲存，各個受體菌分別含有這種生物的不同的基因。
構(gòu)建基因文庫的目的：為了在不知目的基因序列的情況下，便于獲得所需的目的基因。
基因組文庫：含有一種生物的所有基因。
部分基因文庫(如cDNA文庫)：含部分基因，可由mRNA反轉(zhuǎn)錄而來。
(2)利用PCR技術(shù)擴增目的基因
PCR：是一項在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。
原理：DNA雙鏈復(fù)制
原料：模板DNA;RNA引物;四種脫氧核苷酸;熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶);
方法：DNA受熱變性解旋為單鏈、冷卻后RNA引物與單鏈相應(yīng)互補序列結(jié)合、DNA聚合酶作用下延伸合成互補鏈。
過程：熱變性(90-95℃ )、退火(55-60℃)、延伸(70-75℃)。
特點：指數(shù)形式擴增
二.基因表達載體的構(gòu)建(基因工程的核心—體外進行)
1.目的：使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在;可以遺傳給下一代;使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。
3.方法：同種限制酶分別切割載體和目的基因，再用DNA連接酶把兩者連接。
目的基因與運載體結(jié)合(以質(zhì)粒為運載體)
提醒：點這里加小編微信（領(lǐng)取免費資料、獲取最新資訊、解決考教師一切疑問?。?/p>
